Systemic Inflammatory Patterns in Ovarian Cancer Patients: Analysis of Cytokines, Chemokines, and Microparticles / Padrões inflamatórios sistêmicos em pacientes com câncer de ovário: Análise de citocinas, quimiocinas e micropartículas

Abstract Objective To compare the patterns of systemic inflammatory response in women with epithelial ovarian cancer (EOC) or no evidence of malignant disease, as well as to evaluate the profile of systemic inflammatory responses in type-1 and type-2 tumors. This is a non-invasive and indirect way to assess both tumor activity and the role of the inflammatory pattern during pro- and antitumor responses. Materials and Methods We performed a prospective evaluation of 56 patients: 30 women without evidence of malignant disease and 26 women with EOC. The plasma quantification of cytokines, chemokines, and microparticles (MPs) was performed using flow cytometry. Results Plasma levels of proinflammatory cytokines interleukin-12 (IL12), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor alpha (TNF-α) interleukin-1 beta (IL-1β), and interleukin-10 (IL-10), and C-X-C motif chemokine ligand 9 (CXCL-9) and C-X-C motif chemokine ligand 10 (CXCL-10) were significantly higher in patients with EOC than in those in the control group. Plasma levels of cytokine interleukin-17A (IL-17A) and MPs derived from endothelial cells were lower in patients with EOC than in the control group. The frequency of leukocytes and MPs derived from endothelial cells was higher in type-2 tumors than in those without malignancy. We observed an expressive number of inflammatory/regulatory cytokines and chemokines in the cases of EOC, as well as negative and positive correlations involving them, which leads to a higher complexity of these networks. Conclusion The present study showed that, through the development of networks consisting of cytokines, chemokines, and MPs, there is a greater systemic inflammatory response in patients with EOC and a more complex correlation of these biomarkers in type-2 tumors.

Resumo Objetivo Comparar os padrões de resposta inflamatória sistêmica em mulheres com câncer epitelial de ovário (CEO) ou sem evidência de doença maligna, bem como avaliar o perfil de respostas inflamatórias sistêmicas em tumores dos tipos 1 e 2. Esta é uma forma não invasiva e indireta de avaliar tanto a atividade tumoral quanto o papel do padrão inflamatório durante as respostas pró- e antitumorais. Métodos Ao todo, 56 pacientes foram avaliados prospectivamente: 30 mulheres sem evidência de doença maligna e 26 mulheres com CEO. A quantificação plasmática de citocinas, quimiocinas e micropartículas (MPs) foi realizada por citometria de fluxo. Resultados Os níveis plasmáticos das citocinas pró-inflamatórias interleucina-12 (IL12), interleucina-6 (IL-6), fator de necrose tumoral alfa (tumor necrosis factor alpha, TNF-α, em inglês), interleucina-1 beta (IL-1β), e interleucina-10 (IL-10), e da quimiocina de motivo C-X-C 9 (CXCL-9) e da quimiocina de motivo C-X-C 10 (CXCL-10) foram significativamente maiores em pacientes com EOC do que nos controles. Os níveis plasmáticos da citocina interleucina-17A (IL17A) e MPs derivados de células endoteliais foram menores em pacientes com CEO do que no grupo de controle. A frequência de leucócitos e de MPs derivadas de células endoteliais foi maior nos tumores de tipo 2 do que naqueles sem malignidade. Observou-se um número expressivo de citocinas e quimiocinas inflamatórias/regulatórias nos casos de CEO, além de correlações negativas e positivas entre elas, o que leva a uma maior complexidade dessas redes. Conclusão Este estudo mostrou que, por meio da construção de redes compostas por citocinas, quimiocinas e MPs, há maior resposta inflamatória sistêmica em pacientes com CEO e correlação mais complexa desses biomarcadores em tumores de tipo 2.

Los anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 están asociados a circuitos inflamatorios aberrantes en pacientes con enfermedades reumáticas autoinmunes sistémicas / Anti-Ro52/TRIM21 antibodies are associated with aberrant inflammatory circuits in patients with systemic autoimmune rheumatic diseases

Resumen Introducción: Los anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 son marcadores de varias enfermedades reumáticas autoinmunes sistémicas (ERAS). Objetivo: Evaluar si los anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 están relacionados con anomalías en los circuitos inflamatorios. Métodos: Estudio transversal de pacientes consecutivos y ambulatorios con ERAS. Los anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 y la proteína amiloide sérica se midieron mediante ELISA; los paneles para 18 citocinas y nueve quimiocinas se analizaron en una plataforma de lectura Luminex; la proteína C reactiva (hs-CRP) y el complemento se midieron mediante nefelometría. Resultados: Se incluyeron 167 pacientes, 143 con lupus eritematoso sistémico (LES), 16 con síndrome de Sjögren primario y ocho con esclerosis sistémica; 41 fueron positivos para anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 (24 %). Los pacientes con anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 tuvieron niveles séricos más altos de IL-2, IL-4, IL-6, GM-CSF, IL-21, IL-22, hs-CRP y quimiocinas CCL4, CXCL8, CXCL10 y CXCL12; y más bajos de complemento C4. Los títulos de anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 correlacionaron positivamente con IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-21, IL-22, CXCL10 y hs-CRP; y negativamente con complemento C3 y C4. Al incluir solo LES, no se identificó asociación entre los anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 y la actividad de la enfermedad o la afectación específica de órganos. Conclusiones: Los anticuerpos anti-Ro52/TRIM21 se asocian a circuitos aberrantes de citocinas y niveles elevados de moléculas angiogénicas y quimioatrayentes de neutrófilos y monocitos, lo que sugiere un papel activo de esos anticuerpos en las ERAS.

Abstract Introduction: Anti-Ro52/TRIM21 antibodies are markers for several systemic autoimmune rheumatic diseases (SARD). Objective: To assess whether anti-Ro52/TRIM21 antibodies are related to abnormalities in inflammatory circuits. Methods: Cross-sectional study of consecutive outpatients with SARD. Anti-Ro52/TRIM21 antibodies and serum amyloid A protein were measured by ELISA; panels for 18 cytokines and nine chemokines were analyzed on a Luminex reading platform, while high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) and complement were measured by nephelometry. Results: Among 167 included patients, 143 had systemic lupus erythematosus (SLE), 16 had primary Sjögren's syndrome and eight had systemic sclerosis; 41 (24%) were positive for anti-Ro52/TRIM21 antibodies. Patients with anti-Ro52/TRIM21 antibodies had higher serum levels of IL-2, IL-4, IL-6, GM-CSF, IL-21, IL-22, hs-CRP and chemokines CCL4, CXCL8, CXCL10 and CXCL12, but lower levels of complement C4. Anti-Ro52/TRIM21 antibody titers were positively correlated with IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-21, IL-22, CXCL10, and hs-CRP, and negatively with complement C3 and C4. When only SLE patients were included, no association was identified between anti-Ro52/TRIM21 antibodies and disease activity or organ-specific involvement. Conclusions: Anti-Ro52/TRIM21 antibodies are associated with aberrant cytokine circuits and elevated levels of angiogenic molecules and neutrophil and monocyte chemoattractants, which suggests an active role for these antibodies in SARD.

Efecto del Rituximab sobre los niveles circulantes de citocinas y quimiocinas producidas o no por los linfocitos B en pacientes con Artritis Reumatoide

La Artritis Reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune frecuente, caracterizada por inflamación crónica en las articulaciones que puede progresar a la destrucción ósea. Aunque la fisiopatología de la AR no es clara, se ha visto que las células T y las células B desempeñan un importante papel en la misma. Estudios con Rituximab (RTX), un fármaco que elimina las células B CD20+, han contribuido a esclarecer y destacar la participación de las células B en la AR. Las células B pueden contribuir a la autoinmunidad de manera dependiente de la producción de los anticuerpos e independiente de esta producción. Esta última función puede ser debida al papel de las células B como presentadoras de antígeno para las células T y productoras de citocinas y quimiocinas. Para contribuir a entender este último mecanismo, se revisaron los artículos donde se evidenciaron los efectos del tratamiento con RTX sobre la citocinas y quimiocinas circulantes en pacientes con AR. Se encontró que la mayoría de las citocinas estudiadas disminuyeron sus niveles en circulación luego del tratamiento con RTX. La IL-10 y la IL-6 se vieron consistentemente disminuidas en los pacientes que respondieron al tratamiento y podrían ser marcadores del tratamiento con Rituximab.

Summary Rheumatoid Arthritis (RA) is a common autoimmune disease characterized by chronic inflammation in the joints that can progress to bone destruction. Although the pathophysiology of RA is unclear, T cells and B cells are though to be involved. Rituximab (RTX), a drug that eliminates CD20 + B cells, has helped to clarify and highlight the role of B cells in RA. B cells can contribute to autoimmunity by mechanisms dependent on the production of antibodies and independent of this production. The latter may depend on the role of B cells as antigen-presenting cells for T cells and their capacity to produce cytokines and chemokines. To contribute to our understanding of this mechanism, studies that evaluated levels of circulating cytokines and chemokines in patients with RA after treatment with RTX were reviewed. Most cytokines studied decreased their levels in circulation after treatment with RTX. IL-10 and IL-6 consistently were decreased in patients responding to treatment and maybe markers of Rituximab treatment.

Avaliação da carga microbiana e fúngica de sistemas de canais radiculares infectados e a expressão apical de integrinas, citocinas e quimiocinas nos tecidos / Assessment of the microbial and fungal load of infected root canal systems and the apical expression of integrins, cytokines and chemokines in adjacent perirradicular tissues

Este estudo busca avaliar quantitativamente a expressão do RNA mensageiro (mRNA) das integrinas alfa1, alfa4, alfa 5, alfa L, citocinas e quimiocinas, a partir de células presentes no líquido intersticial periapical adjacente a dentes com infecção do canal radicular. Foram selecionados 22 indivíduos com necessidade de tratamento endodôntico e encaminhados à Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Minas Gerais (Belo Horizonte, MG, Brasil). As amostras foram coletadas em 11 dentes necróticos e portadores de infecções endodônticas e 11 dentes hígidos que necessitavam de tratamento endodôntico por motivos protéticos. Após a cirurgia de acesso e antes dos procedimentos de limpeza e modelagem do sistema de canais radiculares (T0), imediatamente após a limpeza e formatação do sistema de canais radiculares(T1), em 7 (T2) e 14 dias (T3), um cone de papel esterilizado endodôntico # 20 foi inserido no SCR, mantido por 2 min, e posteriormente armazenado a -70°C. Real-Time PCR analisou microbiologicamente essas amostras para ler a expressão gênica do rRNA microbiano 16S e fragmentos da região ITS do gDNA fúngico da espécie Candida. Após os procedimentos de limpeza e formatação do SCR, três cones de papel absorvente esterilizados foram inseridos. Passivamente, a ponta do papel ultrapassou o ápice radicular em 2 mm e permaneceu por 2 minutos. As amostras foram coletadas imediatamente após a limpeza e modelagem do RCS, 7 e 14 dias após a primeira sessão. As pontas de papel tiveram os 4 mm finais cortados, inseridos em Eppendorf e armazenados a - 70°C. Com este procedimento, o RNA foi extraído do líquido intersticial periapical para caracterizar as expressões dos genes ITGA1, ITGA4, ITGA5, ITGAL, IL-1ß, TNF-α, IL-17A, IL-10, IFN-γ, CCL2/MCP-1, CCL5, CXCR4, e 16S usando PCR em tempo real. O DNA genômico (gDNA) foi extraído para se avaliar a abundância de Candida utilizando-se sequências ITS, por PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que os níveis de expressão de mRNA do 16S diminuíram após os procedimentos de limpeza e modelagem e que a abundância de Candida foi insipiente na amostra analisada. As citocinas pro- inflamatórias IL-1ß e IL-17 apresentaram níveis de expressão elevados frente a infecção, reduzindo significativamente após os procedimentos de limpeza e formatação. Os níveis de expressão gênica de TNF-α significantemente aumentaram, em ambos os grupos. Não se observou diferença significativa quanto a expressão gênica das citocinas IFN-γ, IL-10, CCL-2 e CCL-5 e das integrinas ITGAL e ITGA5 nos tempos avaliados. A expressão gênica de CXCR4 reduziu significativamente do tempo T1 para o T2, no grupo experimental. As expressões gênicas de ITGA1 e ITGA4, no grupo experimental, reduziram significativamente de maneira tempo dependente. Finalmente, não houve alteração significativa na expressão de marcadores de macrófagos (CD64), enquanto expressão de marcadores de fibroblastos (S100A4) aumentou significativamente no grupo controle. Concluiu-se que a carga microbiana e a abundância de leveduras correlacionam-se positivamente com a expressão de mediadores pró-inflamatórios e que a que terapia endodôntica negativamente impacta a expressão dos mediadores pró-inflamatórios e das integrinas nos tecidos perirradiculares.

This study seeks to quantitatively evaluate the expression of messenger RNA (mRNA) of integrins alpha1, alfa4, alpha 5, alpha L, cytokines, and chemokines, from cells present in the periapical interstitial fluid adjacent to teeth with root canal infection. Twenty-two individuals needing endodontic treatment and referred to the School of Dentistry of the Federal University of Minas Gerais (Belo Horizonte, MG, Brazil) were selected. The samples were collected in 11 necrotic teeth and carriers of endodontic infections and 11 healthy teeth needing endodontic treatment for prosthetic reasons. After access surgery and before root canal system (RCS) cleaning and shaping procedures (T0), immediately after cleaning and shaping the root canal system (T1), in 7 (T2) and 14 days (T3) an endodontic sterilized paper point #20 was inserted into the RCS, maintained for 2 min, and subsequently stored at -70°C. Real-Time PCR microbiologically analyzed these samples to read the gene expression of microbial rRNA 16S and fragments of the ITS region of the Fungus Candida species gDNA. After RCS cleaning and shaping procedures, three sterilized absorbent paper cones were inserted. Passively, the paper point exceeded the root apex by 2 mm and remained for 2 minutes. Samples were collected immediately after RCS cleaning and shaping, 7 and 14 days after the first session. The paper points have the 4 mm of their tip cut, inserted in Eppendorf, and stored at - 70°C. This procedure extracted RNA from the periapical interstitial fluid to characterize the expressions of the genes ITGA1, ITGA4, ITGA5, ITGAL, IL-1ß, TNF- α, IL-17A, IL-10, IFN-γ, CCL2/MCP-1, CCL5, CXCR4, ITS using Real-Time PCR. The results showed that 16S mRNA expression levels decreased after cleaning and modeling procedures and that Candida abundance was incipient in the analyzed sample. Pro-inflammatory cytokines IL-1ß and IL-17 showed high expression levels against infection, significantly reduced after cleaning and formatting procedures. TNF-α gene expression levels significantly increased in both experimental and control groups. No significant difference was observed regarding the gene expression of the cytokines IFN-γ, IL-10, CCL-2, and CCL-5 and the integrins ITGAL and ITGA5. The gene expressions of ITGA1 and ITGA4 in the experimental group were significantly reduced time-dependent. Finally, there was no significant change in their macrophage markers (CD64) expression, while fibroblast markers (S100A4) expression significantly increased in the control group. It was concluded that microbial load and yeast abundance are positively correlated with the expression of pro-inflammatory mediators and that endodontic therapy negatively impacts the expression of pro-inflammatory mediators and integrins in periradicular tissues.

Novo Efeito Cardioprotetor da L-Carnitina em Camundongos Obesos Diabéticos: Regulação da Expressão de Quemerina e CMKLRI no Coração e Tecidos Adiposos / Novel Cardioprotective Effect of L-Carnitine on Obese Diabetic Mice: Regulation of Chemerin and CMKLRI Expression in Heart and Adipose Tissues

Resumo Fundamentos A L-carnitina (LC) tem muitos efeitos benéficos em animais diabéticos e humanos, mas seu efeito regulatório sobre a quemerina como uma citocina inflamatória e seu receptor no estado diabético são desconhecidos. Objetivos O presente estudo teve como objetivo investigar o efeito regulatório da LC na expressão do receptor semelhante ao de quimiocina 1 e quemerina (CMKLRI) em tecidos adiposo e cardíaco de camundongos diabéticos. Métodos Sessenta camundongos NMARI foram divididos em quatro grupos, incluindo controle, diabético, diabético + suplementação com LC e controle + suplementação com LC. O diabetes foi induzido pela alimentação dos animais com dieta hipercalórica por 5 semanas e injeção de estreptozotocina. Os animais foram tratados com 300 mg/kg de LC por 28 dias. Nos dias 7, 14 e 28 após o tratamento, os níveis de mRNA e proteína da quemerina e CMKLRI nos tecidos cardíacos e adiposos de animais foram determinados utilizando análise por qPCR e ELISA. Os índices de resistência à insulina também foram medidos em todos os grupos experimentais. A diferença com p<0,05 foi considerada significativa. Resultados A expressão de quemerina e CMKLRI aumentou nos tecidos cardíaco e adiposo de camundongos diabéticos nos dias 14 e 28 após a indução do diabetes, concomitantemente com a incidência de resistência à insulina e níveis aumentados de quemerina circulante (p<0,05). O tratamento com LC causou uma diminuição significativa na expressão de ambos os genes nos tecidos estudados e redução dos sintomas de resistência à insulina e dos níveis séricos de quemerina (p<0,05). Conclusão Os resultados sugerem que o tratamento com LC pode diminuir a expressão de quemerina e CKLR1 em tecidos cardíacos e adiposos de animais experimentais obesos e diabéticos.

Abstract Background L-carnitine (LC) has many beneficial effects on diabetic animals and humans, but its regulatory effect on chemerin as an inflammatory cytokine, and its receptor in diabetes status is unknown. Objectives The present study aimed to investigate the regulatory effect of LC on the expression of chemerin and chemokine-like receptor I (CMKLRI) in adipose and cardiac tissues of diabetic mice. Methods Sixty NMARI mice were divided into four groups including control, diabetic, diabetic + LC supplementation and control + LC supplementation. Diabetes was induced by feeding the animals a high-calorie diet for 5 weeks and injection of Streptozotocin. The animals were treated with 300 mg/kg LC for 28 days. On days 7, 14, and 28 after treatment, the mRNA and protein levels of chemerin and CMKLRI in the cardiac and adipose tissues of the animals were determined using qPCR analysis and ELISA. Insulin resistance indices were also measured in all experimental groups. Differences with p <0.05 were considered significant. Results Chemerin and CMKLRI expressions levels were increased in cardiac and adipose tissues of diabetic mice on days 14 and 28 after diabetes induction, concurrent with the incidence of insulin resistance and increased levels of circulating chemerin (p<0.05). The treatment with LC caused a significant decrease in the expression of both genes in studied tissues and the reduction of insulin resistance symptoms and serum chemerin levels (p<0.05). Conclusion The results suggest that LC treatment were able to downregulate the expression of chemerin and CKLR1 in cardiac and adipose tissues of obese, diabetic experimental animals.

Implicaciones clínicas de las quimiocinas y sus receptores en la medicina transfusional y el trasplante / Clinical implications of chemokines and their receptors in transfusion medicine and transplantation

Introducción: Las quimiocinas son proteínas secretadas con tamaño en el rango de 8-10 kDa, con numerosas funciones en la fisiología normal y patológica. El término deriva de las palabras citocinas quimiotácticas, que refleja su importante participación en la quimioatracción de leucocitos. Sin embargo, las evidencias muestran que las quimiocinas tienen muchas otras funciones como la comunicación intercelular, la activación celular y la regulación del ciclo celular. Objetivo: Analizar los conocimientos actuales sobre las quimiocinas y sus receptores, y la significación clínica de estas en la medicina transfusional y el trasplante. Métodos: Se realizó revisión de la literatura, en inglés y español, a través del sitio web PubMed y el motor de búsqueda Google académico de artículos publicados en los últimos 10 años. Se efectuó análisis y resumen de la bibliografía revisada. Análisis y síntesis de la información: La transcripción de la mayoría de los genes de quimiocinas es inducible y se produce en respuesta a estímulos celulares específicos. Las quimiocinas son importantes en la movilización de células progenitoras hematopoyéticas para el trasplante y localización de células progenitoras hematopoyéticas trasplantadas. En los modelos de incompatibilidad ABO, las quimiocinas CXC y CC se producen en niveles elevados. Conclusiones: Muchas son las oportunidades de futuras investigaciones sobre las quimiocinas en la medicina transfusional por la considerable redundancia y superposición en la función biológica de estas moléculas y sus receptores. Son solo una parte de un proceso mucho más grande y complejo dentro de la red de citoquinas y otras moléculas del sistema inmune(AU)

Introduction: Chemokines are secreted proteins with size in the range of 8-10 kDa, with numerous functions in normal and pathological physiology. The term derives from the words chemotactic cytokines, reflecting its important role in the chemoattraction of leukocytes. However, the evidence shows that chemokines have many other functions such as intercellular communication, cell activation and cell cycle regulation. Objetive: To present current knowledge about chemokines and their receptors, and the clinical significance of these in transfusion medicine and transplantation. Method: A review of the literature was made, in English and Spanish, through the PubMed website and the Google academic search engine of articles published in the last 10 years. An analysis and summary of the revised bibliography was made. Developing: The transcription of most of the chemokine genes is inducible and occurs in response to specific cellular stimuli. Chemokines play an important role in the mobilization of hematopoietic progenitor cells for the transplantation and localization of transplanted hematopoietic progenitor cells. In the ABO incompatibility models, the CXC and CC chemokines are produced at high levels. Conclusions: There are many opportunities for future research on chemokines in transfusion medicine due to their considerable redundancy and superposition in the biological function of these molecules and their receptors. They are just one part of a much larger and more complex process within the network of cytokines and other molecules of the immune system(AU)

O fator de virulência relacionado ao H. pylori influencia a expressão de quimiocinas CXCL10, CCL17, CCL20, CCL22, e seus receptores por células mononucleares de sangue periféricos de pacientes com úlceras pépticas / The h. pylori-related virulence factor caga influences the expression of chemokines cxcl10, ccl17, ccl20, ccl22, and their receptors by peripheral blood mononuclear cells from peptic ulcer patients

ABSTRACT BACKGROUND: During the Helicobacter pylori (HP) infection, the infiltration of the leukocytes into stomach mucosa is directed by locally produced chemokines that play a decisive role in infection outcome. The CagA is the most potent virulence factor of HP, so that the infection with CagA + strains is associated with more severe complications than infection with CagA - HP. OBJECTIVE: The aim was to determine the expression of chemokines CXCL10, CCL17, CCL20 and CCL22, and their receptors by CagA + HP- and CagA - HP-derived crude extract (HP-CE)-stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from peptic ulcer (PU) patients. METHODS: The serum and the PBMCs were collected from 20 HP-infected PU patients, 20 HP-infected asymptomatic subjects (HIA) and 20 non-infected healthy subjects (NHS). The PBMCs were cultured in absence of stimulator or with 10 µg CagA + HP crude extract (CagA + CE), 10 µg CagA - HP crude extract (CagA - CE). Chemokines and receptors were measured by ELISA and real time-PCR respectively. RESULTS: In PU patients, the production of chemokines CXCL10, CCL17, CCL20 and CCL22, and the expression of chemokine receptors CXCR3, CCR4 and CCR6 by CagA + CE-induced PBMCs were significantly higher than non-stimulated and CagA - CE stimulated cultures. The CXCL10 production by CagA + CE stimulated PBMCs from HIA subjects was significantly higher than the equal cultures from PU and NHS groups. The CCL17 and the CCL20 production by non-stimulated, CagA + CE stimulated, and CagA - CE stimulated PBMCs from PU subjects were significantly higher than the equal cultures from NHS and HIA groups. The CCL22 production by non-stimulated, CagA + CE stimulated and CagA - CE stimulated PBMCs from NHS group were significantly higher than the equal cultures from HIA and PU groups. The CagA + CE stimulated PBMCs from HIA subjects expressed lower amounts of CCR6 in comparison with CagA + CE stimulated PBMCs from NHS and PU groups. The serum levels CXCL10 and CCL20 in PU and HIA groups were significantly higher than NHS subjects. NHS and HIA groups displayed higher serum levels of CCL22 in comparison with PU patients. CONCLUSION: Results indicated that the CagA status of bacterium influence the expression of chemokines and receptors by HP-CE stimulated PBMCs from PU patients.

RESUMO CONTEXTO: Durante a infecção por Helicobacter pylori (HP), a infiltração dos leucócitos na mucosa estomacal é dirigida por quimiocinas produzidas localmente que desempenham um papel decisivo no resultado da infecção. O CagA é o fator de virulência mais potente do HP, de modo que a infecção com cepas CagA + está associada a complicações mais graves do que a infecção com CagA - HP. OBJETIVO: O objetivo foi determinar a expressão das quimiocinas CXCL10, CCL17, CCL20 e CCL22, e seus receptores por CagA + HP- e CagA - extrato bruto (EB) derivado de HP (HP-EB) de células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de pacientes com úlcera péptica (UP). MÉTODOS: O soro e as CMSP foram coletados de 20 pacientes com UP infectados pelo HP, 20 indivíduos assintomáticos infectados pelo HP (AI-HP) e 20 indivíduos saudáveis não infectados pelo HP (NI-HP). As CMSP foram cultivadas na ausência de estimulador ou com extrato bruto CagA + HP de 10 μg (CagA + EB), 10 μg CagA - extrato bruto HP (CagA - EB). Quimiocinas e receptores foram medidos por ELISA e PCR em tempo real, respectivamente. RESULTADOS: Em pacientes com UP a produção de quimiocinas CXCL10, CCL17, CCL20 e CCL22, e a expressão dos receptores de quimiocina CXCR3, CCR4 e CCR6 por CagA + CMSP induzidos pelo EB foram significativamente maiores do que as culturas não estimuladas e CagA - EB estimulados. A produção de CXCL10 por CagA + EB estimulou as CMSP de sujeitos AI-HP em proporção significativamente maior do que as culturas iguais dos grupos UP e NI-HP. A produção de CCL17 e CCL20 por grupos não estimulados, CagA + EB estimulado, e CagA - EB estimulou CMSP de sujeitos com UP e foram significativamente superiores às culturas iguais dos grupos NI-HP e AI-HP. A produção de CCL22 por grupos não estimulados, CagA + EB estimulado e CagA - EB estimulado pelo grupo NI-HP foram significativamente maiores do que as culturas iguais dos grupos AI-HP e PU. O CagA + EB estimulou as CMSP dos sujeitos do AI-HP, expressando menores quantidades de CCR6 em comparação com as CMSP estimuladas pelo CagA + EB de grupos NI-HP e UP. Os níveis sanguíneos de CXCL10 e CCL20 nos grupos UP e AI-HP foram significativamente superiores aos dos sujeitos do NI-HP. Os grupos NI-HP e AI-HP apresentaram níveis sanguíneos mais elevados de CCL22 em comparação com pacientes com UP. CONCLUSÃO: Os resultados indicaram que o estado CagA da bactéria influencia a expressão de quimiocinas e receptores por HP-EB estimulados CMSP de pacientes com UP.

Analysis of the chemerin and resistin adipokines in children and adolescents

SUMMARY OBJECTIVES To compare the serum concentrations of adipokines resistin and chemerin in children and adolescents with eutrophic and overweight and to evaluate their relationship with anthropometric, biochemical, and blood pressure variables. METHODS a cross-sectional epidemiological study was conducted with 234 students enrolled in public elementary schools in the city of Juiz de Fora / MG. Anthropometric evaluation, biochemistry, and blood pressure measurement were performed. Statistical analyzes included the Student-t or Mann-Whitney tests, Pearson or Spearman correlation, used according to the distribution of the variables, and linear regression analysis, by means of the evaluation of the effect of the independent variables on the serum levels of chemerin and resistin, adjusted for age and sex. For the data analysis, SPSS® software version 21.0 and STATA® version 10.1 were used, assuming a significance level of 5%. RESULTS the concentrations of chemerin were higher in eutrophic individuals than in those with excess weight (p> 0.05). In contrast, levels of resistin were higher in the young with excess weight than in the eutrophic ones (p <0.05). In the multiple linear regression analysis, the levels of chemerin were associated with the values of resistin, systolic, and diastolic blood pressure. Resistance levels maintained association only with BMI and chemerin values. CONCLUSION the adipokines analyzed presented a distinct profile in the groups of children and adolescents with eutrophic and overweight.

RESUMO OBJETIVOS Comparar as concentrações séricas das adipocinas resistina e quemerina em crianças e adolescentes com eutrofia e excesso de peso e avaliar sua relação com as variáveis antropométricas, bioquímicas e a pressão arterial. MÉTODOS Estudo epidemiológico transversal realizado com 234 estudantes matriculados em escolas públicas do ensino fundamental no município de Juiz de Fora/MG. Realizou-se avaliação antropométrica, bioquímica e aferição da pressão arterial. As análises estatísticas compreenderam os testes t de Student ou Mann-Whitney, correlação de Pearson ou Spearman, utilizados de acordo com a distribuição das variáveis, e análise de regressão linear, realizada por meio da avaliação do efeito das variáveis independentes nos níveis séricos de quemerina e resistina, ajustado por idade e sexo. Para a análise dos dados foram utilizados os softwares SPSS® versão 21.0 e Stata® versão 10.1, admitindo-se nível de significância de 5%. RESULTADOS As concentrações de quemerina foram maiores nos indivíduos eutróficos do que nos com excesso de peso (p>0,05). Em contrapartida, os níveis de resistina estiveram maiores nos jovens com excesso ponderal do que nos eutróficos (p<0,05). Na análise de regressão linear múltipla, os níveis de quemerina apresentaram associação com os valores de resistina, pressão arterial sistólica e diastólica. Os níveis de resistina mantiveram associação apenas com os valores de IMC e quemerina. CONCLUSÃO As adipocinas analisadas apresentaram perfil distinto nos grupos de crianças e adolescentes com eutrofia e com excesso de peso.

Associação entre marcadores inflamatórios e ocorrência de hospitalizações: evidências da linha de base da coorte de idosos de Bambuí / Association between inflammatory markers and hospitalizations: evidence from the Bambuí cohort of aging baseline

RESUMO: Introdução: A inflamação exerce um importante papel no processo de envelhecimento. Objetivo: Este estudo transversal objetiva examinar a associação entre marcadores inflamatórios e a ocorrência de hospitalizações entre idosos, considerando fatores predisponentes e facilitadores do uso de serviços de saúde e condições de saúde como potenciais fatores de confusão. Métodos: Foram utilizados dados de 1.393 participantes (≥ 60 anos) da linha de base da coorte de Bambuí. Os marcadores considerados foram dez citocinas e quimiocinas (interleucina (IL)-1, IL-6, IL-10, IL-12, fator de necrose tumoral (TNF), CCL2, CCL5, CXCL8, CXCL9 e CXCL10). A variável de desfecho foi a ocorrência de uma ou mais hospitalizações nos 12 meses precedentes. Resultados: Níveis séricos elevados da IL-6 apresentaram associações significantes com a ocorrência de hospitalizações (razão de prevalência - RP = 1,38; intervalo de confiança - IC95% 1,01 - 1,87; e RP = 1,38; IC95% 1,01 - 1,88, para os tercis intermediário e superior, respectivamente). Níveis elevados da CXCL9 também apresentaram associações independentes com o desfecho (RP = 1,38; IC95% 1,02 - 1,89 e RP = 1,46; IC95% 1,07 - 2,00, respectivamente). Os demais marcadores não apresentaram associações estatisticamente significantes com a ocorrência de hospitalizações. Conclusão: Entre os 10 marcadores examinados, IL-6 e CXCL9 apresentaram associação com a ocorrência de hospitalizações.

ABSTRACT: Introduction: Inflammation plays an important role in the aging process. Objective: This cross-sectional study aims to examine the association between inflammatory markers and hospitalizations among older adults, considering as potential confounding factors the predisposing and enabling factors for the use of health services and health conditions. Methods: We used data from 1,393 participants (≥ 60 years) in the baseline cohort from Bambuí. The markers assessed were ten cytokines and chemokines [interleukin (IL)-1, IL-6, IL-10, IL-12, tumor necrosis factor (TNF), CCL2, CCL5, CXCL8, CXCL9, and CXCL10]. The outcome variable was one or more hospitalizations in the preceding 12 months. Results: Elevated serum levels of IL-6 were significantly associated with hospitalizations [prevalence ratio (PR) = 1.38; confidence interval of 95% (95%CI) 1.02 - 1.87 and PR = 1.38; 95%CI 1.01 - 1.88 for the intermediate and highest tertiles, respectively]. High levels of CXCL9 were also independently associated with the outcome (PR = 1.38; 95%CI 1.01 - 1.89 and PR = 1.46; 95%CI 1.07 - 2.00, respectively). Other markers showed no statistically significant association with hospitalizations. Conclusion: Among the ten markers analyzed, only IL-6 and CXCL9 were associated with hospitalizations.

Análise epidemiológica e imunológica em indígenas das etnias Sateré Mawé e Tikuna portadores de infecções endodônticas / Epidemiological and immunological analysis in indigenous people of the Sateré Mawé and Tikuna ethnic groups with endodontic infections

Os povos indígenas compõem 305 etnias, distribuídas por todas as unidades federativas do Brasil. Esta diversidade cultural consiste em uma das maiores riquezas do país, mas, ao mesmo tempo, é também um grande desafio para a elaboração e implementação de políticas públicas específicas e diferenciadas. O objetivo deste estudo foi analisar o perfil epidemiológico de saúde bucal e a necessidade de tratamento endodôntico de indígenas das etnias SATERÉ MAWÉ, que vivem em Barreirinha-AM, e TIKUNA, residentes na zona urbana de MANAUS-AM. Após determinar a necessidade de tratamento endodôntico, este estudo comparou as respostas perirradiculares de infecções endodônticas entre membros de uma civilização ocidental, residentes em Belo Horizonte MG, e indígenas não miscigenados da etnia TIKUNA. Para a análise epidemiológica participaram do estudo 138 indivíduos, sendo 98 pertencentes à etnia TIKUNA e 40 SATERÉ-MAWE; distribuídos nos grupos etários de 7 a 50 anos ou mais. Para a analise imunológica das alterações perirradiculares das populações selecionas, coletaram-se as amostras clínicas em dentes portadores de necrose pulpar. Os indígenas da etnia Tikuna foram atendidos na Clínica de Endodontia da UNIP (Universidade Paulista), campus Manaus. Os membros da população ocidental foram atendidos nas clínicas da Faculdade de Odontologia da UFMG. As amostras foram coletadas imediatamente após a instrumentação do SCR, introduzindo-se cones absorventes nos SCR, 1 mm além do ápice radicular. Subsequentemente, as amostras foram transferidas para um tubo estéril, e mantidas na temperatura de - 70 º C até a sua análise. Utilizando-se o PCR em tempo real, avaliou-se a expressão das citocinas e quimiocinas TNF-, IL-1-, IL-9, INF-, IL-17, IL-10, CXCR-4, CCL-2/MCP-1 e CCR-6. Os resultados demonstram que, em relação à etnia SATERÉ-MAWÉ, na faixa etária de 7 a 12 anos, o CPO-d apresentou valor médio de 3.17. Comparando-se o índice CPO-d e a necessidade de tratamento endodôntico em cada uma das etnias, verificou-se que estas variáveis estão correlacionadas, uma vez que, à medida que o CPO-d aumentou, verificou-se um aumento na necessidade de tratamento endodôntico. Os molares prevaleceram dentre os os dentes mais acometidos por cárie e com necessidade de tratamento endodôntico. Quanto à análise imunológica, observou-se um aumento significativo na expressão gênica de TNF, CCL-2/MCP-1, CXCR4, e CCR6, após os procedimentos de limpeza e formatação dos SCR apenas na população ocidental. Os níveis de INF- aumentaram na 2a coleta na população indigena, enquanto, em ambas as populações, houve um aumento significativo na expressão de IL-10 e IL-17 após os procedimentos de limpeza e formataçao. Não observaram-se diferenças significativas entre as expressões de IL-1 , IL-9, e CCL4, entre a 1ª e 2ª coleta, em ambas as populações. Conclui-se que as populações indígenas encontram-se desasistidas, visto que o CPO-d de ambas as etnias se encontram acima dos padrões recomendados pela OMS, principalmente na faixa etária de 07 a 12anos. Ademais, o nível de escolaridade ainda é muito baixo nas populações indígenas analisadas, mesmo na comunidade Tikuna, situada na zona urbana de Manaus/AM. Finalmente, observaram-se padrões imunes distintos quando se comparou as respostas das comunidades ocidentais e Tikuna, sugerindo que os determinantes genéticos e ambientais devem ser mais bem avaliados no futuro.

The indigenous peoples comprise 305 ethnic groups, distributed by all the federative units of Brazil. This cultural diversity is one of the most significant assets of the country, but at the same time, it is also a great challenge for the elaboration and implementation of specific and differentiated public policies. The objective of this study was to analyse the epidemiological profile of oral health and the need for endodontic treatment of SATERÉ MAWÉ indigenous people living in Barreirinha-AM, and TIKUNA, living in the urban area of MANAUS-AM. After determining the need for endodontic treatment, this study compared the perirradicular responses of endodontic infections among members of western civilisation, living in Belo Horizonte - MG, and no - mixed indigenous TIKUNA. For the epidemiological analysis, the study consisted of 138 individuals, of whom 98 were TIKUNA ethnicity, and 40 were SATERÉ-MAWE ethnics; aged between 7 and 50 years or more. For the immunological analysis of the perirradicular alterations of the selected populations, the clinical samples were collected in teeth with pulp necrosis. The Tikuna Indians were treated at the Endodontics Clinic of UNIP (Universidade Paulista), Manaus campus. The members of the western population were attended in the clinics of the Faculty of Dentistry of UFMG. Samples were collected immediately after SCR instrumentation, introducing absorbent cones in the SCR, 1 mm beyond the root apex. Subsequently, the samples were transferred to a sterile tube and maintained at -70 ° C until analysed. Using the real-time PCR, the expression of cytokines and chemokines TNF-, IL-1-, IL-9, INF-, IL-17, IL-10, CXCR- 2 / MCP-1 and CCR-6. The results show that, concerning the ethnicity SATERÉ-MAWÉ, in the age group of 7 to 12 years, the CPO-d presented a mean value of 3.17. Comparing the CPO-d index and the need for endodontic treatment in each of the ethnicities, these variables were correlated, since, as CPO-d increased, there was an increase in the demand for endodontic treatment. The molars prevailed among the teeth most affected by caries and in need of endodontic treatment. As for the immunological analysis, a significant increase in the gene expression of TNF, CCL-2 / MCP-1, CXCR4, and CCR6 was observed after the SCR cleaning and formatting procedures only in the western population. INF- levels increased in the second collection in the Indian community, while in both people, there was a significant increase in the expression of IL-10 and IL-17 after the cleaning and shaping procedures. There were no significant differences between IL-1, IL-9, and CCL4, between the 1st and 2nd collection, in both populations. It is concluded that the indigenous people are disassociated, since the CPO-d of both ethnic groups is above the standards recommended by the WHO, especially in the age group from 07 to 12 years. Besides, the educational level is still shallow in the indigenous populations analysed, even in the Tikuna community, located in the urban area of Manaus / AM. Finally, distinct immune patterns were observed when comparing Western societies and Tikuna responses, suggesting that genetic and environmental determinants should be better evaluated in the future. Keywords: endodontic treatment, epidemiology, indigenous, cytokines, chemokines, periapical lesion.

Lesão renal glomerular: processo inflamatório e o papel das quimiocinas / Glomerular kidney injury: the inflammatory process and the role of chemokines

As lesões renais podem ser explicadas, de um modo geral, por agressões que causam danos às células e/ou tecidos e à resposta inflamatória gerada por esse processo a partir da ativação do sistema imune e estímulo contínuo de sua ação. Visando realizar o diagnóstico precoce da doença renal crônica e minimizar os aspectos econômicos e os impactos à vida do paciente causados pela instalação e progressão da doença renal, muitos autores procuram explicar os processos inflamatórios que são as linhas de bases de muitas doenças crônicas e os biomarcadores que participam desse processo. Este artigo tem por objetivo fazer uma revisão de literatura narrativa sobre a fisiopatologia da progressão da doença renal glomerular, bem como, as possíveis funções das quimiocinas como marcadores de progressão da doença renal.

Kidney injuries can generally be explained as attacks damaging cells and/or tissues and the inflammatory response generated by such process due to the activation of the immune system and its continuous stimulation. Aiming to reach an early diagnosis of CKD and minimize both the economic aspects and the impacts on the patient's life caused by the onset and progression of kidney diseases, many authors have tried to explain the inflammatory processes that are the baselines of several chronic diseases, as well as the biomarkers that participate in that process. This paper aims to make a narrative literature review on the pathophysiology of the progression of glomerular kidney disease as well as the possible roles played by chemokines as progression markers of renal disease.

Participação de citocinas relacionadas às respostas Th17/Treg na inflamação periapical inflamatória crônica / Role of cytokines related to responses Th17 / Treg in chronic inflammatory periapical disease

A doença periapical inflamatória é uma sequela da infecção e necrose pulpar. Ela representa a resposta de defesa do hospedeiro à agressão proveniente do canal radicular. Assim, lesões periapicais crônicas se desenvolvem como resposta à manutenção da inflamação e à reabsorção óssea. As células T reguladoras (Treg) e células T helper (Th) 17 (Th17) têm papel fundamental na regulação da resposta imunológica. Forkhead box P3 (FoxP3) é o fator de transcrição para as células Treg, mas a diferenciação e maturação das células T naive em Treg ou Th17 depende também de citocinas específicas como o fator transformador de crescimento ß (TGF-ß), interleucina 10 (IL-10), interleucina 17 (IL-17), interleucina 6 (IL-6) e interleucina 21 (IL-21). Outras citocinas participam na modulação da atividade de Treg e Th17 como as quimiocinas CCL4 e CCL20 com função de recrutamento destas células para atuação no processo inflamatório. O papel de Treg e Th17 tem sido muito estudado em doenças autoimunes, mas ainda pouco avaliado na patogenia das lesões inflamatórias periapicais crônicas. Para este estudo foram utilizadas oitenta e sete amostras de tecido periapical humano para realização de análises morfológicas e dosagem de citocinas por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA) (TGF-ß, IL10, IL-17, CCL4, CCL20). As amostras de tecido periapical foram coletadas de três grupos: grupo controle (dentes hígidos), grupo de dentes com necrose pulpar e lesão periapical e grupo de dentes com necrose pulpar sem lesão periapical. Observamos alta expressão de CCL4 e TGF-ß no grupo com lesão periapical quando comparado com os grupos sem lesão e uma correlação positiva entre CCL20 e IL-17, além de um aumento na expressão de CCL20 no grupo com lesão periapical quando comparado ao controle. Nossas observações implicam que essas duas características, tanto pró-inflamatórias quanto imunossupressoras, estão presentes na lesão periapical crônica, ocorrendo de maneira simultânea e com características de co-estimulação, como resultado do intenso trabalho da resposta imunológica do hospedeiro contra o processo inflamatório proveniente das bactérias intracanais e seus subprodutos.(AU)

Inflammatory periapical disease is a sequel of the infection and pulp necrosis. It represents the host defense response to aggression from the root canal. Chronic periapical lesions are developed in response to the maintenance of inflammation and bone resorption. Regulatory T cells (Tregs) and Th17 cells play a key role in regulating the immune response with opposite functions. Forkhead box P3 (FoxP3) is the master transcription factor for Treg cells, but differentiation and maturation of naive T cells in Treg or Th17 also depend on specific cytokines such as transforming growth factor ß (TGFß), interleukin 10 (IL -10), interleukin17 (IL-17), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-21 (IL-21). Other cytokines participate in the modulation of the Treg and Th17 activity, as the chemokines CCL4 and CCL20 with function of recruitment of these cells to act in the inflammatory process. The role of Treg and Th17 has been better studied in autoimmune diseases, but sparsely evaluated in the pathogenesis of chronic periapical inflammatory lesions. Eighty-six human samples were used to perform histologic analysis and the cytokine dosage by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (TGF-ß, IL-10, IL-17, CCL4, CCL20) in the periapical tissue of three groups: control group, group of teeth with pulp necrosis and periapical lesion and group of teeth with necrosis without periapical lesion. We observed high expression of CCL4 and TGF-ß in the group with periapical lesion in comparison with the groups without lesion and demonstrated increased expression of CCL20 in the group with periapical lesion when compared to control. Our findings imply that these two characteristics, pro-inflammatory and immunosuppressive, are present in the chronic periapical lesion, occurring simultaneously and with co-stimulation characteristics, as a result of the intense actionof the host's immune response against the inflammatory process coming from intracanal bacteria and their by-products.(AU)

Inflammatory and immunological profiles in patients with COPD: relationship with FEV 1 reversibility / Perfil inflamatório e imunológico em pacientes com DPOC: relação com a reversibilidade do VEF 1

ABSTRACT Objective: To determine whether COPD severity correlates with sputum cell counts, atopy, and asthma. Methods: This was a cross-sectional study involving 37 patients with COPD and 22 healthy subjects with normal lung function (controls). Sputum cell counts were determined by microscopy after centrifugation of samples. Skin prick tests were performed, and serum cytokines were determined by ELISA. Results: Patients were stratified by bronchodilator response: a non-reversible airflow limitation (nonRAL) group comprised 24 patients showing no significant post-bronchodilator change in FEV1; and a partially reversible airflow limitation (partialRAL) group comprised 13 patients showing FEV1 reversibility (post-bronchodilator FEV1 increase ≥ 12%). The proportion of eosinophils in sputum was higher in the partialRAL group than in the nonRAL group (p < 0.01), and there was an inverse correlation between the proportion of eosinophils and FEV1 (p < 0.05). However, none of the patients had a history of asthma and skin prick test results did not differ between the two groups. In the patient sputum samples, neutrophils predominated. Serum levels of TNF, IL-6, IL-8, and RANTES (CCL5) were higher in patients than in controls (p < 0.001) but did not differ between the two patient groups. Conclusions: COPD patients with partial FEV1 reversibility appear to have higher sputum eosinophil counts and greater airway hyperresponsiveness than do those with no FEV1 reversibility. However, we found that COPD severity did not correlate with atopy or with the cytokine profile.

RESUMO Objetivo: Determinar se a gravidade da DPOC se correlaciona com a contagem de células no escarro, atopia e asma. Métodos: Estudo transversal com 37 pacientes com DPOC e 22 indivíduos saudáveis com função pulmonar normal (controles). As contagens de células no escarro foram determinadas por microscopia após a centrifugação das amostras. Foram realizados testes cutâneos de puntura, e as citocinas séricas foram determinadas por ELISA. Resultados: Os pacientes foram estratificados pela resposta ao broncodilatador: o grupo de limitação ao fluxo aéreo não reversível (LFAnr) envolveu 24 pacientes sem alteração significativa do VEF1 pós-broncodilatador, e o grupo de limitação ao fluxo aéreo parcialmente reversível (LFApr) envolveu 13 pacientes com reversibilidade do VEF1 (aumento do VEF1 pós-broncodilatador ≥ 12%). A proporção de eosinófilos no escarro foi maior no grupo LFApr do que no LFAnr (p < 0,01), e houve uma correlação inversa entre a proporção de eosinófilos e VEF1 (p < 0,05). Entretanto, nenhum dos pacientes apresentou histórico de asma e os resultados dos testes cutâneos não diferiram entre os dois grupos. Nas amostras de escarro dos pacientes, os neutrófilos predominaram. Os níveis séricos de TNF, IL-6, IL-8 e RANTES (CCL5) foram maiores nos pacientes que nos controles (p < 0,001), mas não diferiram entre os dois grupos de pacientes. Conclusões: Pacientes com DPOC e reversibilidade parcial do VEF1 parecem apresentar maiores contagens de eosinófilos no escarro e maior hiper-responsividade das vias aéreas que aqueles sem reversibilidade do VEF1. Entretanto, a gravidade da DPOC não se correlacionou com atopia ou perfil das citocinas.

Serum levels of adiponectin, CCL3/MIP-1α, and CCL5/RANTES discriminate migraine from tension-type headache patients / Níveis séricos de adiponectina, CCL3/MIP-1α, and CCL5/RANTES discriminam pacientes com migrânea e cefaleia do tipo tensional

ABSTRACT Objectives Inflammatory molecules and neurotrophic factors are implicated in pain modulation; however, their role in primary headaches is not yet clear. The aim of this study was to compare the levels of serum biomarkers in migraine and tension-type headache. Methods This was a cross-sectional study. We measured serum levels of adiponectin, chemokines, and neurotrophic factors in patients with migraine and tension-type headache. Depression and anxiety symptoms, headache impact and frequency, and allodynia were recorded. Results We included sixty-eight patients with migraine and forty-eight with tension-type headache. Cutaneous allodynia (p = 0.035), CCL3/MIP-1α (p = 0.041), CCL5/RANTES (p = 0.013), and ADP (p = 0.017) were significantly higher in migraine than in tension-type headache. The differences occurred independently of anxiety and depressive symptoms, frequency and impact of headache, and the presence of pain. Conclusions This study showed higher CCL3/MIP-1α, CCL5/RANTES, and ADP levels in migraine in comparison with tension-type headache. Our findings suggest distinctive roles of these molecules in the pathophysiology of these primary headaches.

RESUMO Objetivos Moléculas inflamatórias e fatores neurotróficos estão implicados na modulação dolorosa, contudo, seu papel nas cefaleias primárias não é claro. O objetivo do presente estudo foi comparar níveis de biomarcadores séricos na migrânea e cefaleia do tipo tensional. Métodos Este foi um estudo transversal, no qual foram avaliados níveis de adiponectina, quimiocinas e fatores neurotróficos em pacientes com migrânea e cefaleia do tipo tensional. Sintomas depressivos e ansiosos, o impacto e a frequência da cefaleia e alodínea foram registrados. Resultados Foram incluídos 68 pacientes com migrânea e 48 pacientes com cefaleia do tipo tensional. A alodínia cutânea (p = 0.035), CCL3/MIP-1α (p = 0.041), CCL5/RANTES (p = 0.013), e adiponectina (p = 0.017) foram maiores na migrânea, independentemente de sintomas depressivos e ansiosos, frequência e impacto da cefaleia. Conclusões Níveis de CCL3/MIP-1α, CCL5/RANTES e adiponectina foram maiores na migrânea do que na cefaleia do tipo tensional, sugerindo papeis distintos destas moléculas na fisiopatologia destas duas cefaleias primárias.

Así comienza la vida plaquetaria: un viaje desde los megacariocitos medulares a las plaquetas circulantes / The birth of a platelet: A trip from bone marrow megakaryocytes to circulating platelets / Começa assim a vida plaquetária: uma viagem desde os megacariócitos medulares às plaquetas circulantes

Tal vez por haber sido consideradas como simples restos citoplasmáticos de los megacariocitos encargadas únicamente de la reparación de heridas, las plaquetas han tenido un lugar secundario en cuanto a su estudio e interés en comparación con los otros componentes celulares de la sangre. Sin embargo, en los últimos 20 años se ha avanzado mucho en el conocimiento de estas fascinantes células que de a poco han recobrado un lugar destacado dentro de la hematología. A lo largo de este trabajo se han revisado los aportes más destacados y novedosos acerca del proceso de biogénesis plaquetaria, su regulación por el microambiente medular y factores humorales, recorriendo desde la generación de megacariocitos hasta la liberación de plaquetas libres.

Perhaps for being considered mere megakaryocyte cytoplasmic debris responsible for wound repair alone, platelets have had a secondary role when compared to other cellular blood components. However, in the last 20 years we have learned much more about these fascinating cells, which have slowly regained a prominent place in hematology. This review discusses the most outstanding and novel contributions on platelet biogenesis, its regulation by the bone marrow microenvironment and humoral factors, analyzing from megakaryocyte generation to platelet release.

Talvez por ter sido considerados simples restos citoplasmáticos dos megacariócitos, encarregadas apenas da reparação de feridas, as plaquetas têm tido um lugar secundário quanto a seu estudo e interesse em comparação com os outros componentes celulares do sangue. Entretanto, nos últimos 20 anos foi possível aprender muito a respeito destas fascinantes células que aos poucos foram recobrando um lugar de destaque dentro da hematologia. Ao longo deste trabalho foram revistas as contribuições mais destacadas e novas acerca do processo de biogênese plaquetária, sua regulação pelo microambiente medular e fatores humorais, percorrendo desde a geração de megacariócitos até a liberação de plaquetas livres.

Histologic and inflammatory lamellar changes in horses with oligofructose-induced laminitis treated with a CXCR1/2 antagonist / Alterações histológicas e inflamatórias no tecido laminar de equinos submetidos ao modelo de laminite por oligofrutose e tratados com um antagonista para CXCR1/2

With the hypothesis that blocking chemokine signaling can ameliorate acute laminitis, the aim was to evaluate the therapeutic effect of intravenous DF1681B, a selective antagonist for CXCR1 and CXCR2 (chemokine receptors), in an oligofructose equine laminitis model. To twelve mixed breed clinically healthy hoses with no previous history of hoof-related lameness was administered oligofructose (10g/kg given by nasogastric tube) and divided into two groups: treated (intravenous DF1681B at 30mg/kg 6, 12, 18, and 24h after oligofructose) and non-treated groups. Laminar biopsies were performed before and 12, 36, and 72h after administering oligofructose. Samples were stained with periodic acid-Schiff (PAS) and scored from 0 to 6 according to epidermal cell and basal membrane changes. The IL-1β, IL-6, and CXCL1 RNA expressions were determined by RT-PCR. Parametric and non-parametric tests were used to compare times within each group (P<0.05). The PAS grades and IL-1β and IL-6 RNA expression increased in the non-treated group, but remained constant in the treated horses. In conclusion, DF1681B therapy reduced laminar inflammation and epidermal deterioration in treated horses. CXCR1/2 blockage should be considered therapeutically for equine acute laminitis.

A expressão de quimiocinas e a infiltração de leucócitos no tecido laminar são característicos de laminite aguda de equinos. O presente estudo avaliou o efeito terapêutico da administração intravenosa de DF1681B , um antagonista seletivo para CXCR1 e CXCR2 (receptores de quimiocinas), em um modelo de laminite equina por oligofrutose. Utilizaram-se doze cavalos sem raça definida, compreendendo quatro machos e oito fêmeas não gestantes, com idade (média ±SD) 7±3,5 anos, pesando 305±35kg e com uma pontuação média de condição corporal de 5±1/9. Os indivíduos elegíveis eram clinicamente saudáveis, sem história prévia de claudicação relacionados ao casco. Após administração de oligofrutose (10g/kg por sonda nasogástrica), os animais foram divididos em dois grupos: tratado (30mg/kg de DF1681B intravenosa, 6, 12, 18 e 24h após a oligofrutose) e não tratado, que recebeu placebo. Biópsias laminares foram realizadas antes e 12, 36 e 72h após a administração de oligofrutose. As amostras foram coradas com ácido periódico de Schiff (PAS) e classificadas de 0-6 de acordo com alterações nas células epidérmicas e na membrana basal. Também determinaram-se as expressões gênicas de IL-1β, CXCL1 e IL-6 por RT-PCR. Testes paramétricos e não paramétricos foram utilizados para comparar os momentos em cada grupo (P<0,05). Estatisticamente, os graus PAS e as expressões de IL-1β e IL-6 se elevaram após a indução no grupo não tratado, mas se mantiveram constantes nos cavalos tratados. Em conclusão, a terapia por DF1681B reduziu a inflamação laminar e a deterioração epidérmica em equinos submetidos ao modelo de intoxicação por oligofructose. O bloqueio de receptores CXCR1/2 deve ser considerado como uma opção terapêutica para prevenção da laminite aguda de equinos.

Inflammatory mediators of neuropathic pain / Mediadores inflamatórios na dor neuropática

ABSTRACT BACKGROUND AND OBJECTIVES: Pro-inflammatory chemical mediators and algogenic substances seem to be confused by the sharing of their actions and by interactions in painful and inflammatory presentation. This study aimed at presenting a review of major inflammatory chemical mediators and place them in neuropathic pain pathophysiology. CONTENTS: Inflammation is the homeostatic response of vascularized tissues to remove harmful agents and restore their normal functions. Nervous system (central and/or peripheral) diseases and injuries may induce neuropathic pain and may also modify inflammatory process nervous mediation. In such pathological conditions, there might be pain without restrict link with admitedly harmful or painful stimuli, as well as there might be inflammation without restrict link with the presence of harmful agents and the need to remove them. Chemical mediators involved in neuropathic pain and inflammation pathophysiology modulate the presentation of both. CONCLUSION: Studies on inflammation offer evidences to support the important role of their chemical mediators in neuropathic pain pathogenesis. In peripheral and central sensitization, a thin borderline between reversibility or not of neuropathic pain may be respected or exceeded by inflammatory mediators actions.

RESUMO JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Mediadores químicos pró-inflamatórios e substâncias algogênicas parecem se confundir pelo compartilhamento de suas ações e pelas interações no quadro doloroso e inflamatório. O objetivo deste estudo foi apresentar uma revisão sobre os principais mediadores químicos inflamatórios e situá-los na fisiopatologia da dor neuropática. CONTEÚDO: A inflamação é a resposta homeostática de tecidos vascularizados no sentido de remoção de agentes lesivos e restauro de suas funções normais. Doenças e lesões no sistema nervoso (central e/ou periférico) podem causar dor neuropática, e, também modificar a mediação nervosa do processo inflamatório. Nessas condições patológicas a dor pode ocorrer sem o vínculo restrito com estímulo reconhecidamente nocivo ou doloroso, assim como ocorrer quadro inflamatório sem o vínculo restrito com a presença de agentes lesivos e a necessidade de removê-los. Os mediadores químicos envolvidos na fisiopatologia da dor neuropática e da inflamação modulam o quadro de ambas. CONCLUSÃO: Os estudos sobre inflamação oferecem evidências para embasar a importância do papel dos seus mediadores químicos na patogênese da dor neuropática. Na sensibilização periférica e, também na central uma fronteira tênue entre a reversibilidade ou não do quadro neuropático pode ser respeitada ou ultrapassada pelas ações de mediadores inflamatórios.

Chemokines and immunity / Quimiocinas e imunidade

Chemokines are a large family of small cytokines and generally have low molecular weight ranging from 7 to 15kDa. Chemokines and their receptors are able to control the migration and residence of all immune cells. Some chemokines are considered pro-inflammatory, and their release can be induced during an immune response at a site of infection, while others are considered homeostatic and are involved in controlling of cells migration during tissue development or maintenance. The physiologic importance of this family of mediators is resulting from their specificity − members of the chemokine family induce recruitment of well-defined leukocyte subsets. There are two major chemokine sub-families based upon cysteine residues position: CXC and CC. As a general rule, members of the CXC chemokines are chemotactic for neutrophils, and CC chemokines are chemotactic for monocytes and sub-set of lymphocytes, although there are some exceptions. This review discusses the potential role of chemokines in inflammation focusing on the two best-characterized chemokines: monocyte chemoattractant protein-1, a CC chemokine, and interleukin-8, a member of the CXC chemokine sub-family.

Quimiocinas são uma grande família de pequenas citocinas e seu peso molecular varia de 7 a 15kDa. As quimiocinas e seus receptores são capazes de controlar a migração e a residência de células imunes. Algumas quimiocinas são consideradas pró-inflamatórias e podem ser induzidas durante a resposta imune no sítio de infecção, enquanto outras são consideradas homeostáticas e estão envolvidas no controle da migração celular durante o desenvolvimento ou a manutenção dos tecidos. A importância fisiológica dessa família de mediadores é resultado de sua especificidade − os membros da família de quimiocinas induzem ao recrutamento de subtipos bem definidos de leucócitos. Existem duas grandes subfamílias de quimiocinas baseadas na posição dos resíduos de cisteínas: CXC e CC. Como regra geral, membros da família de quimiocinas CXC são quimiotáticos de neutrófilos, e as quimiocinas CC são quimiotáticos de monócitos e subtipos de linfócitos, apesar de existirem algumas exceções. Esta revisão discute o potencial papel das quimiocinas na inflamação focando nas duas quimiocinas mais bem caracterizadas: a proteína quimioatraente de monócitos-1, uma quimiocina CC, e a interleucina 8, uma quimiocina membro da subfamília CXC.

Papel da insulina na vigência da peritonite decorrente da infecção por Staphylococcus aureus em animais diabéticos e sadios / Insulin role in peritonitis presence due to Staphylococcus aureus infection in diabetic and healthy animals

A nefropatia diabética é uma doença crônica caracterizada por falência renal, que torna necessária a hemodiálise. A diálise peritoneal é uma alternativa para a hemodiálise, porém causa peritonite e morte, principalmente devido à infecção com Staphylococcus aureus, especialmente em pacientes imunodeprimidos, como pacientes diabéticos. Nossa hipótese é que a insulina possa modular a peritonite causada por S. aureus. Para tanto, investigamos sua intervenção, após a indução de diabetes mellitus, na infecção peritoneal por cepas diferentes de S. aureus, analisando os mecanismos moleculares (produção/liberação de citocinas, expressão de moléculas de adesão) e a atividade microbicida dos macrófagos peritoneais envolvidos. Ratos Wistar, machos, diabéticos (aloxana, 42 mg/kg, i.v., 10 dias) e respectivos controles (salina, i.v.) foram submetidos à injeção intraperitoneal de uma suspensão de S. aureus (5x109 CFU/mL) ou volume equivalente de PBS estéril. Os animais foram submetidos a dois tratamentos com insulina NPH: 1) dose única (1UI e 4UI respectivamente, controle e diabético), administrada por via subcutânea; ou, 2) com 4 doses sendo a primeira administrada 2 horas antes da infecção, seguida de metade desta dose às 17 horas e no mesmo horário pelos próximos 2 dias (dose inicial 4UI e 1UI, grupo diabético e grupo controle, respectivamente), passadas 16 horas da última dose de insulina, a glicemia foi determinada e, em seguida, foi realizada eutanásia e coleta de amostras. Avaliamos: a) número de células no lavado peritoneal (LPe), leucograma e glicemia (monitor de glicose); b) níveis séricos de corticosterona e insulina (ELISA); c) concentrações de citocinas (IL-1ß, TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-12) e quimiocinas (CINC-1, CINC-2, CINC-3) no sobrenadante do LPe (ELISA); d) expressão de moléculas de adesão (P-selectina, PECAM-1, ICAM-1) no endotélio vascular (imunoistoquímica); e) atividade microbicida. Após a infecção com a cepa ATCC 25923, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento no número de leucócitos (350%) e nas concentrações de CINC-1 (1900%), IL-1ß (1300%), IFN-γ (280%), IL-4 (800%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu as concentrações de CINC-1 (17%) e IFN-γ (30%) e o leucócitos (55%); e aumentou a concentração de IL-4 (260%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu o número de leucócitos (82%) e as concentrações de CINC-1 (96%) e CINC-2 (45%); e, aumentou as concentrações de TNF-α (270%), IFN-γ (220%), IL-1ß (42%), IL-6 (760%) e a expressão de ICAM-1 (1360%); enquanto as concentrações de CINC-3, IL-10 e IL-12 não foram alteradas pelos tratamentos com insulina. Após a infecção com a cepa N315 HLA+, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento do número de leucócitos (200%), nas concentrações de CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-γ (200%) e na expressão de PECAM-1 (800%) e diminuição de CINC-2 (92%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu a concentração de CINC-1 (85%); e aumentou a concentração de CINC-2 (2030%), IL-1ß (370%) e IL-4 (250%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu a concentração de CINC-1 (92%); e, aumentou número de leucócitos (66%), as concentrações de CINC-2 (100%), IL-1ß (490%), IL-6 (1870%) e IFN-γ (330%), e os outros parâmetros não foram modificados pelos diferentes tratamentos com insulina. Estes dados sugerem que a insulina possa modular a peritonite induzida por cepas diferentes de S. aureus, controlando pelo menos em parte, o infiltrado inflamatório, a produção das citocinas CINC-1, CINC-2, IL-4, IL-6, IFN-γ, TNF-α e IL-1ß; e, consequentemente a expressão P-selectina e PECAM-1 no endotélio vascular do mesentério

Diabetic nephropathy is a chronic disease characterized by kidney failure, so hemodialysis is necessary. Peritoneal dialysis is an alternative to hemodialysis, but causes peritonitis and death primarily due to infection by Staphylococcus aureus, especially in immunocompromised patients, such as diabetics. Our hypothesis is that insulin can modulate peritonitis caused by S. aureus, therefore, we investigated its action, after diabetes induction, in peritoneal infection with different S. aureus strains, analyzing the molecular mechanisms (cytokines production/release, adhesion molecules expression) and the microbicidal activity of peritoneal macrophages involved. Wistar male diabetic (alloxan, 42 mg/kg, iv, 10 days) and their respective controls (saline,iv) were subjected to intraperitoneal injection of S. aureus suspension (5x109CFU/mL) or an equivalent volume of PBS sterile. Animals were submitted to two treatments with NPH insulin administered subcutaneously : single dose (1IU and 4IU respectively , control and diabetic) 8 hours prior to euthanasia ; or 4 doses : first dose 2 hours before infection (4IU and 1IU , diabetic and control group, respectively), then half this dose of 17 pm and in the same time for the next 2 days, after 16 hours of the last dose, blood glucose was determined, and then it was carried out euthanasia and sampling. We evaluated: a) number of cells in peritoneal wash (PW), white blood cell count and blood sugar (glucose monitor) ; b) serum insulin and corticosterone (ELISA); c) concentrations of cytokines (IL-1ß, TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-12) and chemokines (CINC -1, CINC-2, CINC-3 ) in supernatant of the SBA assay (ELISA); d) expression of adhesion molecules (P- selectin, ICAM-1, PECAM-1) in vascular endothelium ( immunohistochemistry); e) microbicidal activity. After infection with ATCC 25923 strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes number (350%) and in concentrations of CINC-1 (1900%), IL-1ß (1300%), IFN-γ (280%), IL-4 (800%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased concentrations of CINC-1 (17%) and IFN-γ (30%) and leukocytes number (55%); and increased IL-4 concentrations (260%); while treatment with 4 doses decreased leukocytes number (82%) and concentrations of CINC-1 (96%) and CINC-2 (45%); and increased concentrations of TNF-α (270%), IFN-γ (220%), IL-1ß (42%), IL-6 (760%) and expression of ICAM-1 (1360%); while the concentrations of CINC-3, IL-10 and IL-12 were not affected by treatments with insulin. After infection with N315 HLA+ strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes (200%), concentrations of CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-γ (200%) and in the expression of PECAM-1 (800%); and CINC-2 decrease (92%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased the concentration of CINC-1 (85%); and increased concentrations of CINC-2 (2030%), IL-1ß (370%) and IL-4 (250%); while treatment with 4 doses decreased the concentration of CINC-1 (92%); and increased leukocytes number (66%), concentrations of CINC-2 (100%), IL-1ß (490%), IL-6 (1870%) and IFN-γ (330%), and other parameters were not modified by treatments with insulin. These results suggest that both S. aureus strains activate differently the innate response during peritonitis, and insulin was not always able to modulate this response

Microarray analysis of the in vitro granulomatous response to Mycobacterium tuberculosis H37Ra / Análisis con Micromatrices de la respuesta granulomatosa in vitro a Mycobacterium tuberculosis H37Ra

Background: The hallmark of tuberculosis is the granuloma, an organized cellular accumulation playing a key role in host defense against Mycobacterium tuberculosis. These structures sequester and contain mycobacterial cells preventing active disease, while long term maintenance of granulomas leads to latent disease. Clear understanding on mechanisms involved in granuloma formation and maintenance is lacking. Objective: To monitor granuloma formation and to determine gene expression profiles induced during the granulomatous response to M. tuberculosis (H37Ra). Methods: We used a previously characterized in vitro human model. Cellular aggregation was followed daily with microscopy and Wright staining for 5 days. Granulomas were collected at 24h, RNA extracted and hybridized to Affymetrix human microarrays. Results: Daily microscopic examination revealed gradual formation of granulomas in response to mycobacterial infection. Granulomatous structures persisted for 96 h, and then began to disappear. Conclusions: Microarray analysis identified genes in the innate immune response and antigen presentation pathways activated during the in vitro granulomatous response to live mycobacterial cells, revealing very early changes in gene expression of the human granulomatous response.

Antecedentes: La marca histológica de la tuberculosis es el granuloma, una acumulación celular organizada que cumple funciones claves en la defensa del hospedero contra Mycobacterium tuberculosis. Estas estructuras secuestran y confinan a las micobacterias previniendo el desarrollo de enfermedad activa; el mantenimiento a largo plazo de los granulomas conlleva al establecimiento de latencia. Un mejor entendimiento de los mecanismos involucrados en la formación y mantenimiento del granuloma es necesario. Objetivo: Monitorear la formación del granuloma y determinar los patrones de expresión génica inducidos durante la respuesta granulomatosa a M. tuberculosis (H37Ra). Métodos: En este estudio se empleó un modelo in vitro humano previamente caracterizado. La agregación celular fue examinada diariamente mediante microscopia óptica y tinción de Wright por 5 días. Para analizar la expresión génica, los granulomas fueron colectados a las 24 h, se extrajo el RNA sometiéndolo a hibridación a micromatrices de Affymetrix. Resultados: Se observó la formación gradual de granulomas en respuesta a la infección. Los granulomas persistieron por 96 h, y luego se desvanecieron. Conclusiones: Se identificaron genes de la respuesta inmune innata y vías de presentación antigénica activadas durante la respuesta granulomatosa in vitro a células micobacteriales vivas, lo cual reveló alteraciones tempranas de la expresión génica en el inicio de la respuesta granulomatosa humana.